目的:建立HPLC法测定脂脉康胶囊中紫丁香苷的含量测定方法。方法:采用ODS-C_(18)(250×4.6mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.1%磷酸溶液(20:80)为流动相;流速1.0m L·min~(-1);柱温35℃;检测波长260nm。结果:该方法紫丁香苷在4.03μg·mL~(-1)~20.29μg·mL~(-1)浓度范围内具有良好的线性关系,R=0.9999;平均回收率为99.74%,RSD(%)=0.20%。结论:该方法准确、可行,适用于脂脉康胶囊的质量控制方法。
目的:研究金丝桃苷对叠氮钠诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法:将PC12细胞与不同浓度金丝桃苷共同孵育4h后,加入20mmol·L^-1的叠氮钠继续孵育3~24h,观察金丝桃苷的保护作用。采用MTT、Hoechst33342分别检测细胞存活率和细胞形态变化。以Ac-DEVD-AMC为底物检测caspase-3活性,CM-H2DCFDA法用于测定ROS水平。Western blotting用于分析Bcl-2和Bax表达水平。结果:金丝桃苷在0.01,0.1及1μmol·L^-1浓度时,可显著提高叠氮钠作用后PC12细胞的存活率,抑制细胞凋亡,减少细胞内活性氧自由基生成和caspase-3活性,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表达,降低促凋亡因子Bax表达。同时结果显示caspase-3抑制剂呈时间依赖性地减少细胞内活性氧自由基含量。结论:金丝桃苷对叠氮钠诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用,活性氧自由基生成与凋亡进程中caspase-3活性密切相关。