生物大分子的液_固色谱纯化过程中固相载体会产生产物吸附、变性等不良影响。高速逆流色谱无需固相载体 ,且具有高分便率和高回收率的优点 ,其中有机相 水相体系在分离天然产物中应用广泛 ,而应用双水相体系分离生物大分子尚处于研究阶段。双水相高速逆流色谱体系的建立与仪器设备及操作工艺条件密切相关 ,因此利用多分离柱高速逆流色谱仪 ,研究了PEG10 0 0_无机盐双水相体系对标准蛋白质混合物以及卵白蛋白的分离。pH值和PEG浓度对不同种类蛋白质的分配系数影响不同 ,实验发现在pH9 2的 15 0 % (W W)PEG10 0 0 17 0 % (W W)磷酸钾盐体系中 ,细胞色素C、溶菌酶和肌红蛋白的分配系数差异较大 ,且分布合理 ,因而采用该体系在 0 8mL min流速 ,85 0r min转速的条件下 ,成功分离了细胞色素C、溶菌酶和肌红蛋白的混合物。实验也发现在pH9 2的 16 0 % (W W)PEG10 0 0 17 0 % (W W)磷酸钾盐体系中 ,鸡蛋清样品中的主要蛋白质成分 :卵转铁蛋白、卵白蛋白和溶菌酶的分配系数差异最大 ,因而采用该体系在 1 8mL min流速、85 0r min转速的条件下 ,2 0 0min内从鸡蛋清样品中成功分离卵白蛋白 ,其电泳纯度为 10 0 % ,收率为 95 %。
do:i 10. 3969 / j. issn. 1002- 154X. 2010. 12. 002 玻璃基底表面抗蛋白吸附膜的制备 及性能测试 余 海 黄宁平 (东南大学生物科学与医学工程学院 , 生物电子学国家重点实验室 ,江苏 南京 210096) 摘 要 通过分子自组装技术和原子转 移自 由基聚 合方 法 ( ATRP )在玻璃 基底 表面分 别制 备了不 同的 抗蛋 白吸附 膜 ,采用接触角测量 , 光波导模式谱仪和荧光标记蛋白的吸附对膜 表面性能 进行了测试。 结果表明 ,两种方 式形成的 3种抗蛋白吸附膜 能够阻止绝大部分的蛋白吸附 ,其中 ATRP 方式形 成的聚乙 二醇 ( PEG)膜表面其抗 蛋白吸 附性能 略优于自组装膜 ,而磺酸基甜菜 碱 ) 异丁烯酸 ( SBMA )形成的聚合物刷相比于 PEG具有更好的抗蛋白吸附能力。 关键词 玻璃基底 抗蛋白吸附膜 分子自组装