目的运用RP-HPLC法测定哈蟆油中胆固醇棕榈酸酯的含量。方法使用Agilent zorbax-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相∶甲醇-水(79∶21);柱温:30℃;体积流速:1.5 mL/min;检测波长:210nm;进样量均为10μL。结果哈蟆油中胆固醇棕榈酸酯进样量在0.188 4~0.502 4μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.61%,RSD值为1.01%,且重复性、精密度、稳定性均良好。结论此方法可以通过RP-HPLC法快速、稳定、精密的测定哈蟆油中胆固醇棕榈酸酯的含量,减少以往利用正相色谱的不便。