目的探讨一次性96孔U型微板比色法在测量血浆游离血红蛋白含量的可靠性。方法用游离血红蛋白(FHb)含量为200 mg/L的标准品制备成FHb含量不同的标本,再用722G可见光分光光度计和一次性96孔U型微板比色法测出不同OD值制成2条标准曲线,进行回归和相关分析,同时用这两种比色法测量50个上清液样本得到相应OD值,再从对应的标准曲线中算出测量标本的FHb含量,同时对两种方法所得的FHb含量进行统计分析。结果两种方法所制备的2条标准曲线R2值分别为0.945和0.926,两种方法对50份标本测量的FHb值的差异无统计学意义(t=0.78,P>0.05)。结论一次性96孔U型微板法比色在测量血浆游离血红蛋白含量是可行且可靠的。
对亚硝酸钠化的高铁血红蛋白进行了拉曼光谱特性的研究。实验中将正常血红蛋白用亚硝酸钠氧化为高铁血红蛋白,通过测定不同比例高铁血红蛋白/总血红蛋白的拉曼光谱变化研究高铁血红蛋白的拉曼光谱特异性改变,并对不同比例高铁血红蛋白/总血红蛋白在1 586,1 605和1 637cm-1处的拉曼强度进行线性拟合,以实现其定量检测。结果显示,亚硝酸钠与血红蛋白的摩尔比为3.5∶1时可以获得完全氧化的高铁血红蛋白,其拉曼特征峰在499,1 340,1 562,1 622cm-1附近;不同比例高铁血红蛋白/总血红蛋白在1 586,1 605和1 637cm-1处拉曼强度的线性拟合相关系数R2分别为0.972 84,0.997 97和0.991 26,显示出很好的线性关系。研究表明,与正常血红蛋白相比,亚硝酸钠化高铁血红蛋白的拉曼光谱具有特异性改变,其拉曼特征峰的位置和强度随着高铁血红蛋白/总血红蛋白比例的变化而相应发生改变,且比值与拉曼强度存在着线性相关关系,为临床上高铁血红蛋白血症的拉曼光谱检测与量化研究提供了理论基础。
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